領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
優(yōu)化并全合成解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens）殼聚糖酶編碼基因并在畢赤酵母（Pichia pastoris）中實(shí)現(xiàn)分泌表達(dá)，表達(dá)產(chǎn)物的蛋白質(zhì)量濃度達(dá)到0.23 mg/mL。殼聚糖水解酶的最適pH值為5.0，最適溫度為45 ℃，比活力達(dá)52.2 U/mL。該酶在50 ℃以下較穩(wěn)定。利用該酶水解低脫乙酰度殼聚糖并對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行了組成及結(jié)構(gòu)分析。基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜分析結(jié)果顯示，酶解產(chǎn)物中包含聚合度3～15、不同脫乙酰度的殼寡糖。核磁共振鑒定結(jié)果顯示，殼寡糖組分的還原末端及非還原末端均主要由氨基葡萄糖組成。綜上，本研究高效表達(dá)了來源于解淀粉芽孢桿菌的殼聚糖酶，并制備了確定末端結(jié)構(gòu)的殼寡糖，為殼寡糖的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系研究提供理論支持。
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