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1株T1樣噬菌體vB_EcoS_IME18的分離鑒定及其受體分析
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 170 發(fā)表時(shí)間: 2019-06-11
作者: 李 萍,林 洪,童貽剛,王靜雪
關(guān)鍵詞: 大腸桿菌;噬菌體;鑒定;噬菌體受體
摘要:

以大腸桿菌BL21為指示菌分離得到1 株噬菌體vB_EcoS_IME18(IME18),通過電鏡觀察噬菌體形態(tài),并測定其最佳感染復(fù)數(shù)、一步生長曲線、裂解譜和體外殺菌效果;使用Illumina MiSeq測序儀完成噬菌體全基因組測序,利用比較基因組學(xué)分析噬菌體基因組特征;通過篩選噬菌體抗性株分析其耐受原因,利用受體基因沉默突變實(shí)驗(yàn)、噬菌體斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)和噬菌體吸附實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證噬菌體受體。結(jié)果表明,噬菌體IME18具有二十面體頭部和非收縮性尾部,屬于長尾噬菌體科,Tunavirinae亞科,T1類噬菌體;噬菌體IME18的最佳感染復(fù)數(shù)為0.01,潛伏期為5 min,裂解期50 min,爆發(fā)量高達(dá)223 PFU/cell;在體外,噬菌體IME18能在90 min內(nèi)有效殺死處于對(duì)數(shù)期的BL21;噬菌體IME18基因組全長50 354 bp,G+C含量為45.6%;蛋白FhuA、TonB在噬菌體IME18的吸附和侵染過程中發(fā)揮重要作用。

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