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海參腦苷脂對前脂肪細胞分化的抑制作用及機制
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 153 發(fā)表時間: 2019-06-11
作者: 王美玲,劉亞軒,黎晨曼,劉媛媛,符 萌,王靜鳳
關(guān)鍵詞: 海參腦苷脂;3T3-L1細胞;分化;Wnt/β-catenin
摘要:

目的:探究海參腦苷脂在3T3-L1小鼠脂肪細胞增殖以及分化過程中發(fā)揮的作用,并研究其具體機理。方法:運用噻唑藍法探究海參腦苷脂在3T3-L1細胞正常生長過程中發(fā)揮的作用;并通過乳酸脫氫酶實驗探究海參腦苷脂對前脂肪細胞是否存在毒性作用;誘導(dǎo)3T3-L1細胞為成熟細胞,采用油紅O染色法以及測定成熟脂肪細胞中甘油三酯的含量來探究海參腦苷脂是否會改變脂肪細胞的脂質(zhì)積累情況;反轉(zhuǎn)錄熒光實時定量聚合酶鏈式反應(yīng)(reverse transcription real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)測定過氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ)、CCAAT/增強子結(jié)合蛋白α(CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα)以及Wnt/β-catenin通路相關(guān)基因的表達水平。通過Western blotting法測定β-catenin蛋白向核內(nèi)轉(zhuǎn)移的情況。結(jié)果:海參腦苷脂能極顯著抑制3T3-L1細胞的增殖以及分化(P<0.01),且對細胞無毒性作用。qRT-PCR結(jié)果顯示,海參腦苷脂可極顯著抑制脂肪細胞PPARγ和C/EBPα以及Wnt/β-catenin通路相關(guān)基因的表達(P<0.01)。Western blotting結(jié)果表明,海參腦苷脂可以極顯著提高脂肪細胞核內(nèi)β-catenin蛋白的表達水平(P<0.01)。結(jié)論:海參腦苷脂可以明顯地抑制3T3-L1細胞的增殖以及分化,產(chǎn)生這種效果的機理和轉(zhuǎn)錄因子PPARγ、C/EBPα以及Wnt/β-catenin通路相關(guān)。

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