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—— 中國食品雜志社
目的：探究海參腦苷脂在3T3-L1小鼠脂肪細(xì)胞增殖以及分化過程中發(fā)揮的作用，并研究其具體機(jī)理。方法：運(yùn)用噻唑藍(lán)法探究海參腦苷脂在3T3-L1細(xì)胞正常生長過程中發(fā)揮的作用；并通過乳酸脫氫酶實(shí)驗(yàn)探究海參腦苷脂對前脂肪細(xì)胞是否存在毒性作用；誘導(dǎo)3T3-L1細(xì)胞為成熟細(xì)胞，采用油紅O染色法以及測定成熟脂肪細(xì)胞中甘油三酯的含量來探究海參腦苷脂是否會(huì)改變脂肪細(xì)胞的脂質(zhì)積累情況；反轉(zhuǎn)錄熒光實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（reverse transcription real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR）測定過氧化物酶體增殖物激活受體（peroxisome proliferator-activated receptor gamma，PPARγ）、CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α（CCAAT/enhancer binding protein alpha，C/EBPα）以及Wnt/β-catenin通路相關(guān)基因的表達(dá)水平。通過Western blotting法測定β-catenin蛋白向核內(nèi)轉(zhuǎn)移的情況。結(jié)果：海參腦苷脂能極顯著抑制3T3-L1細(xì)胞的增殖以及分化（P＜0.01），且對細(xì)胞無毒性作用。qRT-PCR結(jié)果顯示，海參腦苷脂可極顯著抑制脂肪細(xì)胞PPARγ和C/EBPα以及Wnt/β-catenin通路相關(guān)基因的表達(dá)（P＜0.01）。Western blotting結(jié)果表明，海參腦苷脂可以極顯著提高脂肪細(xì)胞核內(nèi)β-catenin蛋白的表達(dá)水平（P＜0.01）。結(jié)論：海參腦苷脂可以明顯地抑制3T3-L1細(xì)胞的增殖以及分化，產(chǎn)生這種效果的機(jī)理和轉(zhuǎn)錄因子PPARγ、C/EBPα以及Wnt/β-catenin通路相關(guān)。
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