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組成型過表達(dá)ido基因?qū)?-羥基異亮氨酸合成的影響及其發(fā)酵培養(yǎng)基的響應(yīng)面優(yōu)化
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 117 發(fā)表時(shí)間: 2019-09-26
作者: 何繼龍,李英滋,韓世寶,滿德恩,郭脈海,戰(zhàn)俊杰,張成林
關(guān)鍵詞: 4-羥基異亮氨酸|異亮氨酸羥化酶|谷氨酸棒桿菌|組成型過表達(dá)|響應(yīng)面法
摘要:

為考察組成型過表達(dá)異亮氨酸羥化酶(isoleucine dioxygenase,IDO)基因ido對(duì)4-羥基異亮氨酸合成的影響,構(gòu)建ido組成型表達(dá)質(zhì)粒pXM01-ido及菌株HIL017,其ido轉(zhuǎn)錄量及IDO活性較誘導(dǎo)型過表達(dá)菌株HIL016顯著提升,4-羥基異亮氨酸產(chǎn)量較HIL016提高19.4%。為進(jìn)一步提高4-羥基異亮氨酸產(chǎn)量,通過Plackett-Burman試驗(yàn)確定HIL017發(fā)酵培養(yǎng)基中玉米漿、谷氨酸和FeSO4·7H2O用量為主要影響因素,利用最陡爬坡試驗(yàn)和響應(yīng)面法確定其最優(yōu)用量為玉米漿34.1 mL/L、谷氨酸2.98 g/L、FeSO4·7H2O 0.016 7 g/L,此時(shí)4-羥基異亮氨酸理論產(chǎn)量為5.57 g/L。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,最佳條件下4-羥基異亮氨酸產(chǎn)量為5.53 g/L,較優(yōu)化前提高19.7%。

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