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枯草芽孢桿菌殼聚糖酶在畢赤酵母中的高效表達及其酶解特性
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 117 發(fā)表時間: 2019-09-26
作者: 馬 帥,楊紹青,劉翊昊,閆巧娟,江正強
關(guān)鍵詞: 枯草芽孢桿菌|殼聚糖酶|高效表達|酶學(xué)性質(zhì)|殼寡糖
摘要:

研究枯草芽孢桿菌殼聚糖酶基因(BsCsn46)在巴斯德畢赤酵母(Pichia pastoris)GS115中的高效表達、重組酶性質(zhì)及其酶解特性。重組菌在5 L發(fā)酵罐高密度發(fā)酵后胞外酶活力高達50 370 U/mL,蛋白質(zhì)量濃度15.7 mg/mL。粗酶經(jīng)強陰離子交換層析純化,純酶比活力為4 065.7 U/mg,最適pH 6.0,最適溫度55 ℃,在45 ℃以下保持穩(wěn)定。該酶水解3 g/100 mL殼聚糖得到主產(chǎn)物為二糖、三糖和四糖的殼寡糖,水解率為92.8%,殼寡糖得率為90.9%。本研究的重組殼聚糖酶產(chǎn)酶水平和水解效率高,為工業(yè)化制備殼聚糖酶及大規(guī)模制備殼寡糖的應(yīng)用提供了理論支持。

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