領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
為提高南極假絲酵母脂肪酶B（Candida antarctica lipase B，CALB）表達(dá)量，根據(jù)黑曲霉（Aspergillus niger）密碼子偏好性設(shè)計(jì)合成CALB基因，以PnaII/tpi為啟動(dòng)子構(gòu)建CALB表達(dá)載體并轉(zhuǎn)化到黑曲霉HL-1中表達(dá)，搖瓶發(fā)酵120 h后上清液中重組CALB活力為171 U/mL。研究重組CALB的酶學(xué)性質(zhì)，最適反應(yīng)溫度和pH值分別為50 ℃和8.0，在pH 6.0～9.0和45 ℃以下具有較高的穩(wěn)定性，10 mmol/L Cu2＋、Zn2＋和0.1 g/100 mL十二烷基硫酸鈉強(qiáng)烈抑制酶活力，而1 mmol/L Ca2＋、0.1 g/100 mL山梨醇對(duì)酶活力具有非常明顯的激活作用。此外，以硅藻土為載體固定CALB，固定化酶活力為187 U/g。將制備的硅藻土-CALB固定化酶用于生物合成己酸乙酯，經(jīng)反應(yīng)條件優(yōu)化后在無(wú)溶劑體系中己酸乙酯產(chǎn)率達(dá)91%。
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