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溫度、pH值對離體模型中肌原纖維蛋白去磷酸化反應(yīng)的影響
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 119 發(fā)表時(shí)間: 2019-09-26
作者: 任 馳,侯成立,李 欣,擺玉薔,張德權(quán)
關(guān)鍵詞: 蛋白質(zhì)磷酸化;堿性磷酸酶;去磷酸化;溫度;pH值
摘要:

研究溫度(25、15 ℃和4 ℃)和pH值(5.2、5.8、6.4)對堿性磷酸酶活性及催化去磷酸化反應(yīng)能力的影響,為改善肉品質(zhì)提供理論依據(jù)。提取宰后羊肉中的肌原纖維蛋白建立離體模型,添加堿性磷酸酶催化肌原纖維蛋白發(fā)生去磷酸化反應(yīng)。采用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳、Pro-Q Diamond磷酸化蛋白染色和SYPRO Ruby全蛋白染色測定肌原纖維蛋白磷酸化水平,試劑盒測定堿性磷酸酶活性。結(jié)果表明,隨著孵育時(shí)間延長,pH 5.8和pH 6.4條件下堿性磷酸酶組肌原纖維蛋白磷酸化水平顯著下降(P<0.05),pH 5.2條件下堿性磷酸酶組肌原纖維蛋白磷酸化水平無顯著變化(P>0.05)。對照組肌原纖維蛋白磷酸化水平在整個(gè)孵育期間無顯著變化(P>0.05);4 ℃、pH 5.2條件下顯著抑制(P<0.05)堿性磷酸酶活性,使其催化去磷酸化時(shí)間延遲。測定堿性磷酸酶磷酸化水平發(fā)現(xiàn),堿性磷酸酶不僅可以催化肌原纖維蛋白發(fā)生去磷酸化反應(yīng),也能催化其自身發(fā)生去磷酸化反應(yīng),且堿性磷酸酶自身發(fā)生去磷酸化后不會失活。因此在一定范圍內(nèi)升高溫度和pH值會提高堿性磷酸酶催化底物去磷酸反應(yīng)的能力,降低磷酸化水平,且使去磷酸化時(shí)間提前,為改善肉品質(zhì)及肉貯藏提供新思路。

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