目的:以亞麻籽粕為原料,提取蛋白并制備抗氧化活性肽。方法:利用堿性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶酶解蛋白,并通過測定總抗氧化能力(Ferric ion reducing antioxidant power,F(xiàn)RAP)、羥自由基清除能力和2,2’-聯(lián)氮雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)陽離子自由基清除能力表征酶解產(chǎn)物的活性。使用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰氨凝膠電泳和凝膠色譜法分析蛋白和酶解產(chǎn)物的分子質(zhì)量(mw)分布。利用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析鑒定最具有抗氧化活性組分。結(jié)果表明,對于高分子質(zhì)量(3~10 kDa)和低分子質(zhì)量(<3 kDa)的蛋白多肽,低分子質(zhì)量多肽(堿性蛋白酶)的抗氧化活性優(yōu)于其他。10 mg/mL低分子質(zhì)量多肽(堿性蛋白酶)的FRAP相當于(1.77±0.03)mmol/L的FeSO4,羥自由基清除率為(57.13±1.47)%,清除ABTS陽離子自由基的能力(以Trolox當量濃度計算)為(1.19±0.03)mmol/L。通過凝膠色譜分離的最具抗氧化活性組分F2的蛋白質(zhì)量占整體組分的20%,0.1 mg/mL組分F2的FRAP相當于0.29 mmol/L的FeSO4,占整體組分活性的45.3%。亞麻籽粕蛋白氨基酸組成齊全,含人體所需的8 種必需氨基酸,是一種優(yōu)質(zhì)的植物蛋白;蛋白酶解的特異性和肽段分子質(zhì)量共同影響亞麻籽蛋白多肽的抗氧化活性;亞麻籽粕可以制備高抗氧化活性多肽。
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