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人源重鏈鐵蛋白純化及其納米粒制備
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 170 發(fā)表時間: 2020-06-29
作者: 夏小雨,李晗,王震宇,譚曉怡,程述震,杜明
關鍵詞: 人源鐵蛋白;原核表達;蛋白純化;可逆自組裝
摘要:

為探究可逆自組裝活性納米籠形鐵蛋白的成熟高效制備技術,以構建的人源重鏈鐵蛋白(recombinant human H-chain ferritin,rHuHF)大腸桿菌原核表達系統(tǒng)(BL21-pET3a-rHuHF)為對象,在發(fā)酵罐內(nèi)進行高效表達,并對攪拌轉(zhuǎn)速、空氣通量及誘導表達時間3 個關鍵工藝參數(shù)進行優(yōu)化。采用透射電子顯微鏡和動靜態(tài)光散射儀對rHuHF的納米結構及粒徑進行表征。結果顯示:攪拌轉(zhuǎn)速200 r/min、空氣通量1.6 L/min、表達時間9 h為最佳表達條件。經(jīng)鑒定,鐵蛋白存在于菌體胞內(nèi)可溶物部分且具有良好的自組裝活性和單分散籠形結構,9 次實驗中表達量最高達290 mg/L,明顯高于相同條件下?lián)u瓶培養(yǎng)的表達量;pH 7時rHuHF粒徑為(11.23±0.10)nm,pH 2時rHuHF粒徑為(2.73±0.10)nm。本實驗可對鐵蛋白在納米靶向遞送系統(tǒng)中的應用等工作提供一定的科學依據(jù)。

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