領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
選取創(chuàng)傷弧菌單拷貝基因met為靶基因，設(shè)計引物探針，建立對創(chuàng)傷弧菌準(zhǔn)確定量的微滴式數(shù)字聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（droplet digital polymerase chain reaction，ddPCR）方法，并進(jìn)行特異性、靈敏度和重復(fù)性實驗，同時與實時PCR（real-time PCR）方法進(jìn)行比較。結(jié)果顯示，所建立的ddPCR方法可以快速、高效地檢測出創(chuàng)傷弧菌，細(xì)菌純培養(yǎng)物中其定量限可達(dá)323 拷貝數(shù)/mL，檢測限可達(dá)61 拷貝數(shù)/mL，人工污染牡蠣樣品中能最低能檢測到1.13×102 拷貝數(shù)/g的目標(biāo)菌。對人工污染樣品中目標(biāo)菌的檢測，ddPCR的定量結(jié)果約為平板計數(shù)結(jié)果的1.4 倍，比real-time PCR方法的檢測更加穩(wěn)定準(zhǔn)確。本研究建立的ddPCR檢測方法能快速準(zhǔn)確、特異、靈敏地定量檢測創(chuàng)傷弧菌。
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