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基于菌株水平腸道內植物乳桿菌定性定量研究方法的建立
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 157 發(fā)表時間: 2020-07-22
作者: 姜帥銘,馬臣臣,游政凱,張家超
關鍵詞: 植物乳桿菌;腸道;抗性基因;特異性基因序列;實時聚合酶鏈式反應
摘要:

以1 株具有潛在益生功效的Lactobacillus plantarum HNU082為例,采用傳統(tǒng)選擇性分離培養(yǎng)和基因組學技術相結合的研究方法,從菌株定性研究角度,首先基于L. plantarum HNU082全基因組序列通過比較基因組學方法篩選獲得該菌株的特異性片段,設計引物與其他L. plantarum菌株共擴增進行菌株特異性引物的篩選和驗證。其次,基于菌株全基因組抗性基因的注釋選取相應抗生素進行驗證,使其更容易從宿主腸內容物中實現(xiàn)分離。通過選擇性培養(yǎng)基的分離和特異性引物的驗證完成菌株的定性分析。同時,基于菌株特異性引物,通過實時聚合酶鏈式反應技術完成菌株拷貝數(shù)的定量研究。最后,通過1 例大鼠實驗驗證了本方法的可行性和準確性。基于此,建立了L. plantarum HNU082菌株在腸道內的定性定量研究方法。本研究建立完善的宿主腸道內L. plantarum HNU082定性定量研究方法,將為益生乳桿菌的體內研究提供重要方法學支持。

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