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黃桿菌褐藻膠裂解酶的高效表達(dá)及其在褐藻寡糖制備中的應(yīng)用
來(lái)源：食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 161 發(fā)表時(shí)間: 2021-03-15
作者: 江君，劉軍，楊紹青，馬帥，閆巧娟，江正強(qiáng)
關(guān)鍵詞: 褐藻膠裂解酶；黃桿菌；枯草芽孢桿菌；高密度發(fā)酵；褐藻寡糖
摘要:

研究黃桿菌褐藻膠裂解酶基因（rFlAlyA）在枯草芽孢桿菌中的高效表達(dá)，高密度發(fā)酵48?h最高酶活力為2?550?U/mL，蛋白質(zhì)量濃度達(dá)4.5?mg/mL。經(jīng)(NH4)2SO4沉淀和SP強(qiáng)陽(yáng)離子交換柱純化后得到電泳級(jí)純酶，分子質(zhì)量約為30?kDa。褐藻膠裂解酶rFlAlyA最適pH值為7.5，在pH?4.0～11.0范圍內(nèi)可保持80%以上酶活力；最適溫度為50?℃，在50?℃及以下可保持80%以上酶活力。底物特異性分析表明，rFlAlyA特異性降解聚甘露糖醛酸片段，最短鏈底物為甘露糖醛酸三糖。rFlAlyA在最適條件下酶解褐藻酸鈉4?h后還原糖質(zhì)量濃度達(dá)33?mg/mL，底物轉(zhuǎn)化率為70.1%，電噴霧電離-質(zhì)譜分析酶解產(chǎn)物的聚合度（degree of polymerization，DP）為1～8，離子色譜分析顯示DP=3時(shí)相對(duì)含量最高，為34.0%。結(jié)果表明，經(jīng)枯草芽孢桿菌高效表達(dá)的rFlAlyA可用于制備褐藻寡糖。

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