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淀粉酶基因的克隆及其在工業(yè)啤酒酵母中的表達
來源:食品科學網 閱讀量: 127 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 劉增然, 何秀萍, 龍章富, 張博潤, 劉世貴
關鍵詞: 工業(yè)啤酒酵母菌|淀粉酶|基因的克隆和表達|
摘要:

以扣囊復膜孢酵母菌總DNA為模板, 通過PCR擴增克隆到約1.5kb的α-淀粉酶基因(AMY)。用酵母菌穿梭載體YEp352為出發(fā)質粒,磷酸甘油酸激酶基因1(PGK1)啟動子和乙醇脫氫酶基因1(ADH1)終止子為調控元件構建了含α-淀粉酶基因編碼序列的酵母菌重組表達質粒pLA8。pLA8導入工業(yè)啤酒酵母菌,在以淀粉為唯一碳源的YNBS培養(yǎng)基上篩選陽性轉化子,轉化子培養(yǎng)液中α-淀粉酶活性為1.1U/ml,細胞破碎液的酶活性為0.3U/ml,而受體菌培養(yǎng)液及細胞破碎液中未檢測到α-淀粉酶活性。

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