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氧氟沙星完全抗原的合成鑒定及其單克隆抗體的制備純化
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 134 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 于海峰, 張森, 萬忠海, 李曉艷, 譚建華
關(guān)鍵詞: 氧氟沙星; 單克隆抗體; 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn);
摘要:

本試驗(yàn)通過碳二亞胺(EDC)法把氧氟沙星(OFLX)與載體蛋白BSA和OVA分別進(jìn)行偶聯(lián)制備免疫抗原和包被抗原,并采用紫外掃描法和SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳方法對合成抗原進(jìn)行了鑒定。通過雜交瘤常規(guī)技術(shù)獲得了抗OFLX的單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株7株,用辛酸-硫酸銨法對腹水進(jìn)行了純化。純化腹水均屬IgG1型。經(jīng)過ELISA方法鑒定,純化后的抗體效價(jià)>1:128000;交叉實(shí)驗(yàn)證明所得抗體與達(dá)氟沙星、洛美沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星、卡那霉素、慶大霉素、泰樂菌素均沒有交叉反應(yīng),表現(xiàn)了良好的敏感性和特異性。

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