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具纖溶活性菌株ND2的篩選及其納豆激酶基因的克隆、表達
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 128 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 胡忠,吳奕瑞,林鍵,莊東紅
關鍵詞: 枯草芽孢桿菌; 納豆激酶; 基因克隆與表達;
摘要:

從市售的納豆制品中分離并純化出一株具有高效纖溶活性的菌株ND2,經(jīng)生理生化特性及16SrRNA序列分析鑒定為芽孢桿菌屬的枯草芽孢桿菌。通過正交試驗優(yōu)化菌株ND2的發(fā)酵條件,得到ND2產(chǎn)納豆激酶的最佳條件:氮源-大豆蛋白胨,碳源-淀粉,碳氮比3:1,37℃,pH6.0。經(jīng)PCR擴增得到825bp的納豆激酶成熟肽基因,采用pET32a(+)表達載體和BL21(DE3)為宿主菌,在溫度為37℃、1‰IPTG濃度下可誘導獲得較高表達量的重組納豆激酶。

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