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沙門氏菌DNA提取及PCR反應(yīng)條件的優(yōu)化
來源：食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 124 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 邵碧英, 陳彬, 湯敏英, 吳謙, 張?bào)w銀
關(guān)鍵詞: 沙門氏菌； 基因組DNA； PCR； 優(yōu)化；
摘要:

分別采用煮沸法和CTAB/NaCl法提取沙門氏菌及對(duì)照菌株的基因組DNA,紫外測(cè)定和電泳結(jié)果表明CTAB/NaCl法提取到的DNA的濃度和純度較煮沸法理想。合成分別擴(kuò)增沙門氏菌屬特異基因hut基因(495bp)、hilA基因(490bp)、invA基因(284bp)和hns基因(152bp)的引物,對(duì)PCR反應(yīng)條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明可同時(shí)用于這四種基因檢測(cè)的PCR反應(yīng)條件為:94℃預(yù)變性5min;94℃變性40s,60℃退火40s,72℃延伸50s,40個(gè)循環(huán);72℃延伸5min。

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