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—— 中國食品雜志社
本研究旨在探究矢車菊素-3-O-葡萄糖苷（cyanidin-3-O-glucoside，C3G）對H2O2誘導RAW264.7細胞氧化損傷的保護作用及其機制。通過噻唑藍法測定C3G和過氧化氫分別對RAW264.7細胞存活率的影響；采用酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測細胞內(nèi)超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）活力以及一氧化氮（nitric oxide，NO）和丙二醛（malondialdehyde，MDA）水平；利用2’,7’-二氯熒光素二乙酸酯活性氧熒光探針檢測細胞內(nèi)活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平；通過逆轉(zhuǎn)錄定量聚合酶鏈式反應(yīng)和Western blot法分別測定相關(guān)mRNA和蛋白表達水平。結(jié)果表明，C3G（6.25～25.00 μmol/L）能顯著抑制H2O2誘導RAW264.7細胞活性降低（P＜0.05）。C3G顯著降低H2O2誘導RAW264.7細胞內(nèi)ROS過表達、MDA水平和NO釋放（P＜0.05），顯著增加SOD和GSH-Px活力（P＜0.05）。此外，與空白對照相比，400 μmol/L H2O2處理組中，蛋白激酶Mst1/2和Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白Keap1的mRNA及蛋白相對表達水平顯著上調(diào)（P＜0.05），而細胞中核因子E2相關(guān)因子和下游抗氧化酶HO-1的mRNA及蛋白相對表達水平顯著下調(diào)（P＜0.05）；而采用C3G干預RAW264.7細胞，上述相關(guān)mRNA及蛋白的相對表達水平被逆轉(zhuǎn)。結(jié)論：C3G對H2O2誘導RAW264.7細胞氧化損傷保護作用，可能與激活Mst/Nrf2信號通路和提高抗氧化酶活性有關(guān)。
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