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乙醇脫氫酶I基因敲除的釀酒酵母重組菌構(gòu)建的初步研究
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 159 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 葛菁萍, 宋剛, 宗祥, 凌宏志, 蔡柏巖, 劉松梅, 平文祥
關(guān)鍵詞: 釀酒酵母; 基因敲除; 乙醇脫氫酶I;
摘要:

本實驗根據(jù)釀酒酵母乙醇代謝途徑,構(gòu)建一株低乙醇產(chǎn)量的釀酒酵母基因工程菌株,以滿足人們對低醇啤酒的需要。利用抗性基因篩選基因敲除突變體的方法,通過引物L(fēng)1和L2擴(kuò)增潮霉素B基因(兩翼與釀酒酵母同源),按常規(guī)醋酸鋰法轉(zhuǎn)化酵母細(xì)胞后,篩選標(biāo)記與酵母adhI基因發(fā)生同源重組,得到一株ADHI酶活性降低的工程菌株。發(fā)酵實驗結(jié)果表明,轉(zhuǎn)化菌株乙醇含量平均值為1.8%(V/V),較原始菌株低了65%。說明轉(zhuǎn)化菌株體內(nèi)乙醇生成途徑受到干擾。

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