領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
采用(NH4)2SO4鹽析和連續(xù)柱層析法從鱸魚（Lateolabrax japonicus）骨骼肌中分離純化了一種脯氨酰內(nèi)肽酶（prolyl endopeptidase，PEP）。通過(guò)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析，得到43 個(gè)與紅鰭東方鲀的PEP高度一致的肽片段，證實(shí)該酶為PEP。以琥珀酰-甘氨酰-脯氨酸-4-甲基-7-香豆素為底物，確定PEP的最適pH 6.0和最適溫度35 ℃。溫度變化對(duì)PEP活力的影響較大，通過(guò)圓二色譜檢測(cè)顯示加熱對(duì)PEP的二級(jí)結(jié)構(gòu)有較為明顯的影響，且熱變性不可逆。通過(guò)分子克隆技術(shù)獲得PEP全長(zhǎng)cDNA開放閱讀框含2 226 個(gè)核苷酸，編碼741 個(gè)氨基酸殘基，預(yù)測(cè)分子質(zhì)量為84.12 kDa。通過(guò)同源建模得到鱸魚PEP的分子結(jié)構(gòu)，PEP為典型的α/β水解酶折疊排列，其催化三聯(lián)體（His-711、Asp-672、Ser-585）被β-折疊形成的螺旋槳區(qū)域的中心通道所覆蓋。催化活性中心空間構(gòu)象穩(wěn)定對(duì)維持PEP活力至關(guān)重要，而其獨(dú)特的分子結(jié)構(gòu)是底物特異性的基礎(chǔ)。
2023年第44卷 2022年第43卷 2021年第42卷 2020年第41卷 2019年第40卷 2018年第39卷 2017年第38卷 2016年第37卷 2015年第36卷 2014年第35卷 2013年第34卷 2012年第33卷 2011年第32卷 2010年第31卷 2009年第30卷 2008年第29卷 2007年第28卷 2006年第27卷 2005年第26卷 2004年第25卷 2003年第24卷 2002年第23卷 2001年第22卷 2000年第21卷 1999年第20卷 1998年第19卷 1997年第18卷 1996年第17卷 1995年第16卷 1994年第15卷 1993年第14卷 1992年第13卷 1991年第12卷 1990年第11卷 1989年第10卷 1988年第09卷 1987年第08卷 1986年第07卷 1985年第06卷 1984年第05卷 1983年第04卷 1982年第03卷 1981年第02卷 1980年第01卷
電話: 010-87293157
地址: 北京市豐臺(tái)區(qū)洋橋70號(hào)
版權(quán)所有 @ 2023 中國(guó)食品雜志社 京公網(wǎng)安備11010602060050號(hào) 京ICP備14033398號(hào)-2
