領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
為克隆、表達(dá)密蘇里游動(dòng)放線菌葡萄糖異構(gòu)酶(GI)基因xylA，并對(duì)其誘導(dǎo)表達(dá)條件進(jìn)行初步優(yōu)化。采用Slowdown PCR方法克隆得到密蘇里游動(dòng)放線菌(Actinoplanes missouriensis)CICIM B0118(A)的葡萄糖異構(gòu)酶基因xylA，構(gòu)建pET-28a(+)-xylA 表達(dá)載體，并轉(zhuǎn)化至E. coli BL21 (DE3)，經(jīng)異丙基-β -D- 硫代半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)表達(dá)，并對(duì)其表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行SDS-PAGE 電泳。結(jié)果表明，融合蛋白分子質(zhì)量約為45kD。在誘導(dǎo)時(shí)間9h、0.6mmol/L IPTG、30℃和OD600nm 值為0.8 的最適培養(yǎng)條件下，酶比活力最高達(dá)到62.42U/mL。
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