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藍圓鲹肝臟酯酶的分離純化與性質(zhì)分析
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 192 發(fā)表時間: 2022-05-30
作者: 孫樂常,文嘉欣,杜瀚,林怡晨,劉光明,曹敏杰
關(guān)鍵詞: 藍圓鲹;肝臟;酯酶;純化;性質(zhì)分析
摘要:

以藍圓鲹肝臟為對象,通過硫酸銨鹽析、Q-Sepharose陰離子交換柱層析、Q-HP陰離子交換柱層析、Phenyl Fast Flow疏水柱層析和Superdex G75凝膠過濾柱層析技術(shù)分離純化得到一種酯酶。該酶的回收率為0.69%,純化倍數(shù)為1 150 倍。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳與Superdex G75凝膠過濾柱層析結(jié)果顯示純化得到的酯酶分子質(zhì)量為61.18?kDa。肽指紋圖譜顯示其肽段與紅鰭東方鲀假定脂酰輔酶A水解酶一致。該酶的最適條件為pH?8.0、50?℃;在pH?6.0~10.0、溫度4~40?℃條件下穩(wěn)定性較高;金屬離子K+、Zn2+、Cu2+、Al3+和Fe2+會使酯酶活性顯著下降,而Ba2+、Ca2+、Mn2+、Co2+和Mg2+則會促進酶活性;該酶對甲醇、乙醇、丙酮和異丙醇等有機溶劑與鹽具有較強的耐受性。底物特異性表明該酶在水溶液中偏向于水解中短鏈酯,對長鏈酯無水解活性,而在乳化體系中對長鏈酯也有較高的水解活性,顯示出其具有酯酶與脂肪酶的雙重活性。

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