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從畢赤酵母中提取外源重組蛋白的超聲破碎條件及優(yōu)化
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 148 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 戴佳錕,,李 燕4,馬 齊,關(guān)正君,張 超,張艷婷,趙榮榮,尉亞輝,*
關(guān)鍵詞: 畢赤酵母|超聲破碎法|人脂聯(lián)素蛋白|Western Blotting免疫印記技術(shù)
摘要:

建立適用于從畢赤酵母菌中提取外源重組蛋白的超聲破碎方法。采用Western Blotting免疫印記技術(shù)檢測(cè)從畢赤酵母菌中提取的外源人脂聯(lián)素蛋白活性,并以外源人脂聯(lián)素蛋白活性作為考察指標(biāo),采用單因素和L9(33)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),對(duì)超聲破碎條件進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明:在外源人脂聯(lián)素蛋白活性最高的情況下,超聲破碎條件為超聲破碎功率450W、時(shí)間25min、時(shí)間間隔(工作時(shí)間:間歇時(shí)間)10:10(s/s),此時(shí)細(xì)胞破碎率為(67.8±2.1)%。若在超聲破碎時(shí)添加1mmol/L PMSF,雖對(duì)細(xì)胞破碎率并無顯著影響,但外源人脂聯(lián)素蛋白活性將會(huì)明顯增高。

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