領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
為確定超嗜熱古菌Thermococcus siculi HJ21α-淀粉酶(TSA)中特定氨基酸及所在位點(diǎn)與酶活性間的關(guān)系，以含TSA基因的pEt-28a-His6質(zhì)粒為模板，利用定點(diǎn)突變技術(shù)，將第186位點(diǎn)的天冬氨酸(Asp)突變?yōu)樘於０?Asn)，突變子轉(zhuǎn)化至E. coli BL21(DE3)并經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)，測(cè)定突變前后的酶活性，定點(diǎn)突變后的TSA無(wú)酶活性；采用DNAStar和Deepview蛋白分析軟件，預(yù)測(cè)突變前后TSA蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)，結(jié)果表明Thermococcus siculi HJ21α-淀粉酶的186位點(diǎn)對(duì)維持TSA的酶活性具有重要意義，它的突變導(dǎo)致酶蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)組件及氫鍵網(wǎng)絡(luò)的改變。
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