目的:探討榆干離褶傘溶栓酶(Lyophyllum ulmarium fibrinolytic enzyme,LUFE)在大鼠動(dòng)脈血栓形成過(guò)程中對(duì)血管內(nèi)膜損傷的保護(hù)作用。方法:將50 只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、阿司匹林組和LUFE低、高劑量組。建立血栓模型前,阿司匹林組和LUFE低、高劑量組分別以10 mg/kg mb阿司匹林和100、400 mg/kg mb LUFE灌胃7 d。次日,除假手術(shù)組以外其余4 組以三氯化鐵誘導(dǎo)建立大鼠頸動(dòng)脈血栓模型。蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin,HE)染色觀察頸動(dòng)脈血管形態(tài)學(xué)變化;酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定血清C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP)、白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-6、IL-8、單核細(xì)胞趨化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、細(xì)胞間黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)和血小板-內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1(platelet endothelial cell adhesion moleculer-1,PECAM-1)水平;采用流式細(xì)胞儀測(cè)定血小板-白細(xì)胞聚集體(platelet-leukocyte aggregates,PLA)水平。在體外,經(jīng)LUFE干預(yù)后觀察血小板在固化膠原上的黏附作用;采用流式細(xì)胞儀測(cè)定膠原刺激后血小板Ca2+水平;Western blot方法觀察血小板T細(xì)胞跨膜連接蛋白(linker for activation of T cells,LAT)和磷脂酶Cγ(phospholipase Cγ,PLCγ)磷酸化水平。結(jié)果:LUFE干預(yù)后能明顯減輕血管內(nèi)膜的損傷,不同程度地降低血栓模型大鼠血清CPR、IL-6、IL-8、MCP-1、ICAM-1和PECAM-1水平,降低PLA水平。在體外,LUFE能降低血小板與膠原的黏附,并降低血小板Ca2+水平,下調(diào)血小板LAT和PLCγ蛋白的磷酸化水平。結(jié)論:LUFE抑制血栓形成過(guò)程中的血管炎癥反應(yīng),這可能與其血管內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)作用和抗血小板作用有關(guān)。
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