領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）擴(kuò)增出地皮菜（Nostoc commune Vauch.）一種新型水應(yīng)激蛋白（water stress protein，WSP）的基因（GenBank 序列號(hào)：KF003026），連接到原核表達(dá)載體pET28a上，測(cè)序鑒定后轉(zhuǎn)化入大腸桿菌BL21，獲得一種新型水應(yīng)激蛋白表達(dá)工程菌；經(jīng)異丙基-β-D-硫代半乳糖苷（isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside，IPTG）誘導(dǎo)表達(dá)及鎳離子親和層析柱（Ni-NTA）純化后，得到了帶6×His標(biāo)簽、分子質(zhì)量大小為40 kD的可溶性目的蛋白，稱其為重組水應(yīng)激蛋白1（recombinant water stress protein 1，Re-WSP1）。細(xì)胞增殖抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Re-WSP1蛋白可以抑制結(jié)腸癌細(xì)胞SW480的增殖，而對(duì)正常結(jié)腸上皮FHC細(xì)胞無(wú)明顯作用；DAPI細(xì)胞核染色結(jié)果表明，該蛋白能夠誘導(dǎo)SW480細(xì)胞凋亡小體的形成；Western blotting結(jié)果顯示，Re-WSP1蛋白能夠促進(jìn)Procaspase-3和Procaspase-8的活化剪切。以上結(jié)果表明：Re-WSP1蛋白能夠明顯的抑制結(jié)腸癌SW480細(xì)胞的增殖，并可能通過(guò)Caspase依賴途徑誘導(dǎo)SW480細(xì)胞凋亡。
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