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不同等電點沉淀法和超速離心法提取牛奶乳清蛋白的雙向電泳分析
來源：食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 188 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 陳靜廷，卜登攀，馬 露，楊永新，李發(fā)弟
關(guān)鍵詞: 牛奶；乳清蛋白；等電沉淀；超速離心；提取方法；雙向凝膠電泳圖譜
摘要:

為探索牛奶乳清蛋白提取的最適方法，以生鮮荷斯坦牛奶為對象，采用不同等電點（pH 4.6和pH 4.8）沉淀法和超速離心法提取牛奶乳清蛋白樣品，并對提取效果進行雙向凝膠電泳（two-dimensional electrophoresis，2-DE）圖譜分析。依據(jù)凝膠圖譜上蛋白斑點比較圖譜質(zhì)量，采用PDQuest 8.0凝膠圖像分析軟件進行凝膠圖譜分析。結(jié)果顯示：2 種方法均能有效提取牛奶乳清蛋白，且獲得的2-DE凝膠圖譜背景清晰、蛋白點個體獨立、無明顯的拖尾現(xiàn)象，且重復(fù)性強，但都存在一定的酪蛋白殘留。與超速離心法相比，pH 4.6沉淀法和pH 4.8沉淀法提取乳清蛋白的2-DE凝膠圖譜可檢測到較多的蛋白質(zhì)斑點。pH 4.6沉淀法提取乳清蛋白制備的2-DE凝膠圖譜中蛋白點的表達豐度略高于pH 4.8沉淀法。研究表明：pH 4.6沉淀法提取乳清蛋白制備2-DE凝膠圖譜略優(yōu)于pH 4.8沉淀法和超速離心法。但2 種等電點沉淀法和超速離心法都可有效去除牛奶中的高豐度酪蛋白，提高低豐度蛋白的檢出敏感性。

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