領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
目的：構(gòu)建基于逆轉(zhuǎn)錄微滴式聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（reverse transcriptase droplet digital polymerase chain reaction，RT-ddPCR）技術(shù)的食品中諾如病毒（norovirus，NoV）定量檢測(cè)方法。方法：篩選引物探針，建立并優(yōu)化GI、GII型NoV和MS2噬菌體一步法RT-ddPCR檢測(cè)體系，確定特異性。利用NoV RNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和MS2噬菌體RNA確認(rèn)RT-ddPCR檢測(cè)體系的定量限、準(zhǔn)確度和重復(fù)性。制備人工陽(yáng)性樣品，分析MS2噬菌體對(duì)定量結(jié)果的影響。結(jié)果：3 個(gè)RT-ddPCR檢測(cè)體系具有良好的特異性、準(zhǔn)確度和重復(fù)性，NoV RT-ddPCR檢測(cè)體系的定量限包含104～100 拷貝/μL 5 個(gè)數(shù)量級(jí)，MS2噬菌體RT-ddPCR檢測(cè)體系定量限與NoV相當(dāng)，添加與不添加MS2噬菌體的人工陽(yáng)性樣品的定量結(jié)果無(wú)顯著差異（P≥0.05）。結(jié)論：NoV RT-ddPCR檢測(cè)體系可準(zhǔn)確定量NoV RNA，MS2噬菌體不影響定量結(jié)果，可作為過(guò)程控制的模式病毒被添加到食品中，指示回收率，計(jì)算食品中NoV實(shí)際載量。
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