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白鰱魚背側(cè)肌焦磷酸酶的純化及酶學特性
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 190 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 劉 瑋,徐 萌,張雅瑋,周 黎,馬志方,王復龍,彭增起
關鍵詞: 焦磷酸酶;純化;酶學特性;背側(cè)肌;白鰱魚
摘要:

通過粗分離、50%~80%飽和度硫酸銨分級沉降、DE-52陰離子交換柱層析等步驟,從白鰱魚背側(cè)肌中分離純化出焦磷酸酶。通過變性凝膠電泳分析,該酶在十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳圖譜中僅有一個分子質(zhì)量為40 kD的條帶。酶學特性研究表明,白鰱魚背側(cè)肌焦磷酸酶可專一性地水解焦磷酸鹽,反應初速率時間范圍為0~15 min,最適反應溫度為45 ℃,最適反應pH值為7.5。Mg2+對該酶有明顯的激活作用,在Mg2+濃度為5 mmol/L時酶活力最高。5 mmol/L的Ca2+、Zn2+、乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid,EDTA)-Na2、EDTA-Na4、KIO3和1 mmol/L的NaF均對該酶有強烈的抑制作用。該酶水解焦磷酸四鈉的最大反應速率為0.051 U/mg,米氏常數(shù)為0.54 mmol/L。

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