領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
探討以纖維二糖為底物合成海藻糖的可行性。首先克隆來自施氏假單胞菌A1501的otsA/otsB基因，外源導(dǎo)入Escherichia coli BL21（DE3）構(gòu)建以葡萄糖為底物合成海藻糖的OtsAB途徑。繼而通過過表達(dá)E. coli本身的galU基因增加海藻糖合成前體物質(zhì)尿苷二磷酸（uridine diphosphate，UDP）-葡萄糖的含量，使海藻糖產(chǎn)量提高了3 倍。通過添加井岡霉素抑制海藻糖的降解，進(jìn)一步提高海藻糖的產(chǎn)量。在此基礎(chǔ)上，過表達(dá)來自天然纖維素分解細(xì)菌Saccharophagus degradans的纖維二糖磷酸化酶基因cepA，使重組大腸桿菌具有利用纖維二糖產(chǎn)海藻糖的能力。利用該重組大腸桿菌全細(xì)胞催化生產(chǎn)海藻糖，底物為20 g/L纖維二糖，并添加0.05 mmol/L的井岡霉素抑制海藻糖降解時(shí)，48 h后可生成1.3 g/L的海藻糖。本研究利用重組大腸桿菌以纖維二糖為底物合成海藻糖，證實(shí)了以纖維二糖為底物合成海藻糖的可行性，為纖維二糖來源精細(xì)化學(xué)品的生產(chǎn)提供了新的思路。
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