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犢牛盲腸微生物總DNA的提取方法
來源:食品科學網(wǎng) 閱讀量: 177 發(fā)表時間: 2018-01-15
作者: 于萍, 王加啟, 卜登攀, 鄧露芳, 劉開朗, 魏宏陽, 周凌云,
關(guān)鍵詞: 犢牛盲腸微生物; 細菌總DNA; PCR擴增; 超聲波細胞破碎; 反復(fù)珠磨法;
摘要:

采用反復(fù)凍融法、玻璃珠法和超聲波+反復(fù)珠磨的方法提取犢牛盲腸的微生物總DNA,并對以上三種方法進行比較,從中確定最佳的方法,以實現(xiàn)普通實驗條件下成功提取符合PCR擴增要求的DNA。經(jīng)紫外分光光度分析表明,超聲波+反復(fù)珠磨的方法所得的DNA的A260/A280的比值為1.81,0.8%瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果顯示,所提DNA片段分子量大于20 kb,適于酶解和PCR擴增要求。以提取的DNA樣品為模板,利用細菌通用引物,對其16S rDNA進...

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