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—— 中國食品雜志社
通過比對篩選，從Micromonospora sp. CNB394中獲得高活性的L-脯氨酸-4-羥基化酶，隨后利用規(guī)律成簇的間隔短回文重復-associated protein 9基因編輯方法，通過強化L-脯氨酸合成途徑和引入高活性的L-脯氨酸-4-羥基化酶，構建1 株以葡萄糖為碳源合成反式-4-羥基-L-脯氨酸的大腸桿菌基因工程菌HYP15。搖瓶發(fā)酵30 h，工程菌的反式-4-羥基-L-脯氨酸產(chǎn)量達到13.6 g/L。5 L發(fā)酵罐分批補料發(fā)酵40 h，反式-4-羥基-L-脯氨酸產(chǎn)量達到48.6 g/L，糖酸轉(zhuǎn)化率和平均生產(chǎn)強度分別達到21.6%和1.22 g/（L·h），具有良好的工業(yè)應用前景。
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