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基于免疫親和層析和ProteoMiner處理的母乳乳清蛋白質(zhì)組學(xué)分析
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 149 發(fā)表時(shí)間: 2021-01-08
作者: 靳登鵬,周雄,劉煥,楊嬌,黃卓權(quán),卜玲玲,柯倩華,柳春紅
關(guān)鍵詞: 母乳;多克隆抗體;免疫親和層析;蛋白質(zhì)組
摘要:

在去除母乳中高豐度蛋白的基礎(chǔ)上,運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)分析母乳中具有重要生物學(xué)特定功能的低豐度蛋白。以1 月左右的成熟乳為實(shí)驗(yàn)材料,先通過免疫親和層析和ProteoMiner低豐度蛋白富集試劑盒2 種前處理方法去除高豐度蛋白,再進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析。結(jié)果表明,2 種方法都有去除高豐度蛋白的效果,免疫親和層析法處理后鑒定出蛋白質(zhì)49 種,ProteoMiner低豐度蛋白富集試劑盒處理后鑒定出蛋白質(zhì)172 種。對合計(jì)鑒定出的186 種蛋白進(jìn)行生物信息學(xué)分析,Gene Ontology(GO)注釋分析發(fā)現(xiàn),這些蛋白質(zhì)功能主要集中在細(xì)胞部分、細(xì)胞過程和結(jié)合活性等方面。以Pathway數(shù)據(jù)庫作為參考,依據(jù)代謝途徑可將蛋白質(zhì)定位到201 個代謝途徑分支,涉及PI3K-Akt信號通路、磷脂酶D信號通路等。與Cluster of Orthologous Groups of proteins(COG)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對表明,這些蛋白質(zhì)主要參與碳水化合物的運(yùn)輸和新陳代謝、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制等生命活動。研究結(jié)果不僅有助于了解母乳低豐度蛋白的功能,而且可為嬰幼兒的健康成長和疾病預(yù)防提供理論依據(jù),為母乳喂養(yǎng)的保護(hù)作用機(jī)制及有關(guān)乳腺疾病研究提供技術(shù)支撐。

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