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產(chǎn)谷氨酸脫羧酶金銀花內(nèi)生菌的鑒定及其轉(zhuǎn)化特性研究
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 126 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 楊勝遠(yuǎn), 陸兆新, 孫力軍, 別小妹, 呂鳳霞, 曾曉雄
關(guān)鍵詞: 谷氨酸脫羧酶; 金銀花; 植物內(nèi)生菌; 巨大芽孢桿菌; 16S rDNA; 生物轉(zhuǎn)化;
摘要:

從金銀花植株莖中分離到了1株具有谷氨酸脫羧酶活性的內(nèi)生細(xì)菌,1g菌體(DW)24h可將241.224μmolL-Glu轉(zhuǎn)化生成GABA。通過(guò)引物設(shè)計(jì),利用PCR擴(kuò)增出該菌株的16SrDNA序列,大小為1459bp。通過(guò)形態(tài)特征、生理生化特征和16SrDNA序列分析鑒定EJH-7為巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium)。同時(shí)基于16SrDNA構(gòu)建了系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù),并對(duì)EJH-7進(jìn)行了系統(tǒng)發(fā)育分析。Bacillus megateriumEJH-7細(xì)胞轉(zhuǎn)化谷氨酸生成GABA的最適反應(yīng)溫度和pH分別為30℃和5.5;表面活性劑Tween20和Tween80對(duì)轉(zhuǎn)化反應(yīng)活性有抑制作用,而Triton100影響不顯著;Ca2+、Cu2+和Co2+對(duì)轉(zhuǎn)化反應(yīng)活性有促進(jìn)作用,分別提高了20.36%、46.61%和6.77%,而K+、Fe2+、Zn2+、Mg2+和Mn2+有不同程度的抑制作用。

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