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長壽老人體內(nèi)分離的鼠李糖乳桿菌RAPD體系優(yōu)化研究
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 129 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 顧瑞霞, 蔡敬敬, 王琴, 楊振泉, 任遠慶
關(guān)鍵詞: 鼠李糖乳桿菌; RAPD; 優(yōu)化;
摘要:

采用CTAB改良法提取11株鼠李糖乳桿菌的基因組DNA,對其完整性進行了測定,并以此為模板進行RAPD反應(yīng)。優(yōu)化的RAPD反應(yīng)體系為:模板50ng,Taq酶2U,dNTPs 3.25mmol/L,隨機引物5mmol/L,10×PCR緩沖液2.5μl,Mg2+7.5mmol/L,反應(yīng)總體積為25μl;PCR擴增參數(shù):93℃2min,36℃1min,72℃2min1次循環(huán);93℃1min,36℃1min,72℃2min,40次循環(huán);93℃1min,36℃1min,72℃10min1次循環(huán)。

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