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—— 中國食品雜志社
本研究將AF1514蛋白的重組基因轉化到大腸桿菌(E.coli BL21)并通過在12℃條件下的誘導表達產(chǎn)生了大量的目的蛋白。用鎳柱親和層析和分子篩Superdex-75凝膠過濾層析的兩步蛋白純化方法進一步純化蛋白AF1514后,獲得純度較高的蛋白(純度>95%)。純化的母體蛋白和甲基化處理后的蛋白衍生物分別用懸滴汽相擴散法在16℃結晶。初步篩選所用的400多種結晶條件中,適合晶體生長的條件只有3種,其中最佳晶體生長條件溶液的成分包含0.1mol/L醋酸鈉,pH5.0,0.1mol/L氯化鈉和8%～14%(W/V)2-甲基2,4-戊二醇。蛋白晶體屬于四方晶系,初步X-射線衍射分辨率為2.09A0。
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