領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
為研究油體系統(tǒng)在植物中表達(dá)外源蛋白的優(yōu)勢(shì)，以油菜總DNA 為模板，通過(guò)PCR 得到油菜油體(Ycoil)及啟動(dòng)子序列(Ycprm)。同時(shí)，將多對(duì)合成的寡核苷酸鏈，通過(guò)PCR 方法拼接得到血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子全長(zhǎng)基因(VEGF)。以此為基礎(chǔ)，構(gòu)建Ycoil、Ycprm、VEGF 融合表達(dá)載體p1390Ycprm-Ycoil-VEGF。將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿 菌GV3101，并用花浸染法對(duì)擬南芥進(jìn)行浸染。在含潮霉素(20mg/L)的1/2MS 培養(yǎng)基上篩選轉(zhuǎn)基因擬南芥種子(T0)，獲得了T1 代抗性植株，通過(guò)PCR 檢測(cè)、SDS-PAGE 檢測(cè)和Western blotting 檢測(cè)，結(jié)果表明油菜油體及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的融合基因已經(jīng)轉(zhuǎn)入擬南芥中，并成功得到表達(dá)，轉(zhuǎn)化率約為0.1%。
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