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微波提取蘋果汁中脂環(huán)酸芽孢桿菌DNA的PCR檢測(cè)方法研究
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 124 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 焦凌霞,華承偉,樊明濤,*,魏新元
關(guān)鍵詞: 脂環(huán)酸芽孢桿菌|蘋果汁|微波處理|聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)|檢測(cè)限
摘要:

根據(jù)Genbank公布的酸土脂環(huán)酸芽孢桿菌(Alicyclobacillus acidoterrestris DSM 3922T)鯊烯環(huán)化酶序列自行設(shè)計(jì)一對(duì)引物,利用微波技術(shù)直接從果汁樣品中提取目標(biāo)菌DNA,對(duì)引物特異性、微波法提取DNA的擴(kuò)增效果及檢測(cè)靈敏度進(jìn)行探討。結(jié)果表明:微波功率1000W、處理時(shí)間30s、經(jīng)5000r/min離心2min即可獲得酸土脂環(huán)酸芽孢桿菌基因組DNA,所得模板質(zhì)量符合聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)要求,目的條帶清晰,檢測(cè)時(shí)間僅為2h,檢測(cè)限為200CFU/mL,有望真正應(yīng)用于蘋果汁生產(chǎn)的在線檢測(cè)。

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