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—— 中國食品雜志社
酶法制備的骨膠原蛋白肽為混合肽，通常具有多種潛在的生物活性，但目前缺乏基于促成骨細胞增殖活性的靶向性研究。本實驗以酶法制備的牦牛骨膠原蛋白肽為原料，采用高效液相色譜法與納米液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分別測定混合肽的分子質(zhì)量與序列構成，基于與表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）的CDOCKER半柔性對接，靶向篩選具有潛在促成骨細胞增殖活性的骨膠原蛋白肽，并進行體外細胞增殖培養(yǎng)驗證。結果表明，共鑒定得到78?條牦牛骨膠原蛋白肽，主要以低分子質(zhì)量肽段為主（小于3?000?Da的組分占91.8%），通過與EGFR對接發(fā)現(xiàn)，多肽GPAGPQGPRGDKGETGEQ（GP-18，1?736.815?Da）、TPEVDDEALEKFDK（TP-14，1?634.775?Da）、GPAGPQGPRGDKGETGE（GP-17，1?608.757?Da）、GKSGDRGETGPAGPAGPIGPV（GK-21，1?875.951?Da）和GKSGDRGETGPAGPAGPIGPVG（GK-22，1?932.973?Da）具有潛在促成骨細胞增殖活性。小鼠前成骨細胞系MC3T3-E1細胞培養(yǎng)實驗結果表明，3.0?mg/mL?GK-22促成骨細胞相對增殖率達106%，顯著高于空白組（P＜0.05）。本研究可為促成骨細胞增殖活性肽的靶向篩選和工業(yè)化制備提供理論參考。
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