領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
采用紫外、硫酸二乙酯復(fù)合誘變的方法對(duì)能選擇性降解植物甾醇側(cè)鏈的新金分支桿菌MN2進(jìn)行誘變處理，利用梯度平板技術(shù)篩選高底物耐受性突變株，通過搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其轉(zhuǎn)化性能，以期篩選出具有較高底物耐受性且轉(zhuǎn)化生成雄烯二酮（androst-4-ene-3,17-dione，AD）能力提高的突變株。最終篩選到1 株能在含高濃度底物平板上生長(zhǎng)的AD突變株MN4。在底物甾醇投料量為20 g/L，搖瓶發(fā)酵144 h時(shí)AD生成率為40.9%，較出發(fā)菌株提高了15.1%。經(jīng)斜面接種連續(xù)傳代5 次，MN4突變株遺傳性狀穩(wěn)定。對(duì)突變株MN4的發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化，通過正交試驗(yàn)確定的最佳培養(yǎng)基配比為：葡萄糖1 g/L，玉米漿25 g/L，磷酸二氫鈉0.6 g/L，硝酸鈉6.2 g/L，豆油160 g/L。根據(jù)該配方進(jìn)行轉(zhuǎn)化，得到AD的生成率為50.6%。
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