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基于微滴數(shù)字PCR技術(shù)的嬰幼兒配方乳粉中雙歧桿菌定量檢測(cè)及應(yīng)用
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 192 發(fā)表時(shí)間: 2023-01-03
作者: 李恩靜,王丹,薛晨玉,楊紅蓮,耿健強(qiáng),穆同娜,吳燕濤,呂瑩
關(guān)鍵詞: 微滴式數(shù)字聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);平板計(jì)數(shù)法;雙歧桿菌;定量檢測(cè);嬰幼兒配方乳粉
摘要:

應(yīng)用微滴式數(shù)字聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)技術(shù),建立嬰幼兒配方乳粉中雙歧桿菌定量檢測(cè)方法。以雙歧桿菌的單拷貝特異性基因rpsL為目標(biāo)基因設(shè)計(jì)引物探針,對(duì)ddPCR條件進(jìn)行優(yōu)化,考察方法的特異性、靈敏度和重復(fù)性,并與平板計(jì)數(shù)方法進(jìn)行對(duì)照驗(yàn)證。結(jié)果表明,建立的方法具有良好的特異性、靈敏性和重復(fù)性。細(xì)菌純培養(yǎng)液的檢出限為296 CFU/mL,模擬樣品檢出限為7 300 CFU/g,不與10 種近緣乳酸菌發(fā)生交叉反應(yīng),且重復(fù)性較好,采用已建立的ddPCR方法和平板計(jì)數(shù)方法對(duì)市售嬰幼兒配方乳粉樣品進(jìn)行檢測(cè),2 種方法測(cè)定值結(jié)果偏差小于10%,結(jié)果一致性較好。本研究建立的ddPCR方法對(duì)嬰幼兒配方乳粉中的雙歧桿菌定量檢測(cè)能夠更快速、靈敏、準(zhǔn)確,具有一定的應(yīng)用前景。

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