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人工設(shè)計(jì)短肽PF1和PF2的克隆表達(dá)及其對(duì)葡萄糖氧化酶活性的影響
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 180 發(fā)表時(shí)間: 2023-01-03
作者: 李傳博,魯明杰,張慶芳,林禹彤,竇少華
關(guān)鍵詞: 葡萄糖氧化酶;帶電荷短肽;克隆表達(dá)
摘要:

人工設(shè)計(jì)并合成2 條等電點(diǎn)分別為12.01和3.18的短肽PF1、PF2,基因全長(zhǎng)均為309 bp。以PF1-F、PF1-R、PF2-F和PF2-R為引物,擴(kuò)增至pET-30a(+)載體中進(jìn)行克隆表達(dá)。經(jīng)Ni-NTA分離純化得到純蛋白。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳與Western Blot分析表明:表達(dá)出的目的蛋白與預(yù)期估算大小一致。純化后的短肽加入葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD)催化作用體系中,表明純化后的短肽分別使GOD活力提高8.34%和降低6.88%。因此可以說(shuō)明,人工設(shè)計(jì)的不同電短肽PF1、PF2可以促進(jìn)或抑制GOD的催化作用,進(jìn)一步拓寬GOD在食品發(fā)酵和食品保鮮方面的應(yīng)用范圍。

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