領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
目的：研制用于食品中星狀病毒核酸檢測的cRNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。方法：利用基因克隆體外轉(zhuǎn)錄方法制備星狀病毒cRNA純品，初步定量后稀釋至適宜濃度進(jìn)行分裝，其中一部分分裝樣品添加RNAsafe處理，剩余部分不做處理，制備2 種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣品。采用實(shí)時(shí)熒光定量實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（real-time-polymerase chain reaction，RTPCR）方法檢驗(yàn)2 種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣品均勻性和穩(wěn)定性。樣品中RNA濃度（拷貝/μL）通過熒光定量RT-PCR和數(shù)字PCR聯(lián)合定值獲得，并進(jìn)行不確定度分析。結(jié)果：均勻性結(jié)果顯示2 種樣品組間精密度與組內(nèi)精密度差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。穩(wěn)定性檢驗(yàn)表明20～25 ℃ 10 d、4 ℃ 14 d、－20 ℃ 3 個(gè)月及－80 ℃和液氮6 個(gè)月2 種樣品cRNA含量無顯著變化。RNAsafe（－）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值為：（1.652±0.143）×108 拷貝/μL（－80 ℃）和（1.652±0.135）×108 拷貝/μL（液氮）。結(jié)論：RNAsafe（－）標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣品可作為用于星狀病毒核酸檢測的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。
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