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多重實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)熔解曲線法同步鑒別藍(lán)鰭金槍魚、裸蓋魚、異鱗蛇鯖
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 178 發(fā)表時(shí)間: 2021-01-08
作者: 許隨根,李家鵬,李金春,陳曦,楊君娜,熊蘇玥,黃鑫,喬曉玲,曲超,王守偉
關(guān)鍵詞: 魚類;摻假;多重實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng);熔解曲線分析;藍(lán)鰭金槍魚;裸蓋魚
摘要:

為實(shí)現(xiàn)魚類及其制品摻假的快速鑒別,以藍(lán)鰭金槍魚(Thunnus thynnus)線粒體DNA的D-loop區(qū)、裸蓋魚(Anoplopoma fimbria)線粒體DNA的16S rRNA基因及異鱗蛇鯖(Lepidocybium flavobrunneum)線粒體DNA的ND4L基因?yàn)榘形稽c(diǎn),設(shè)計(jì)擴(kuò)增產(chǎn)物熔解溫度(Tm)具有顯著性差異的特異性引物,建立一種快速鑒別魚類及其制品中藍(lán)鰭金槍魚、裸蓋魚、異鱗蛇鯖源性成分的3 重實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)熔解曲線分析法,通過引物特異性、靈敏度及市售樣品的檢測,對(duì)該方法進(jìn)行檢驗(yàn)和評(píng)價(jià)。結(jié)果表明:構(gòu)建優(yōu)化的方法具有良好的特異性及靈敏度,單物種DNA檢出限為0.001 ng,多物種混合DNA檢出限均為0.1 ng,藍(lán)鰭金槍魚、裸蓋魚、異鱗蛇鯖源性成分的相對(duì)檢出限分別為0.5%、1%、0.5%,通過對(duì)市售樣品的檢測表明,該方法可用于實(shí)際樣品摻假的快速鑒別。

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