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實時PCR檢測食品中熒光假單胞菌方法的建立
來源：食品科學網(wǎng) 閱讀量: 217 發(fā)表時間: 2021-01-08
作者: 閔可，張政，周雨蕾，侯溫甫，王宏勛，周敏
關鍵詞: 熒光假單胞菌；實時聚合酶鏈式反應；gyrB基因
摘要:

針對熒光假單胞菌分子檢測靶點gyrB基因設計引物和探針，制備標準質(zhì)粒，繪制標準曲線，建立熒光假單胞菌實時聚合酶鏈式反應（real-time polymerase chain reaction，real-time PCR）檢測體系。特異性評價表明該體系能夠特異性檢測熒光假單胞菌，其他細菌均無檢出。靈敏性檢測結(jié)果表明純DNA水平靈敏度可達14.3 fg/μL，純培養(yǎng)物水平上檢測靈敏度為3.0×102 CFU/mL。抗干擾性實驗結(jié)果表明當加入低濃度背景干擾菌時，對上述體系檢測靈敏度沒有影響。人工污染樣品檢測表明適當增菌可檢測到熒光假單胞菌，說明TaqMan探針real-time PCR法特異性強、靈敏度高、抗干擾性能力強

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