領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
目的：比較4 種不同的pET 載體在表達(dá)抗黃曲霉毒素B1(AFB1)的單鏈抗體(scFv)克隆的特點(diǎn)，確定用以表達(dá)scFv-H4 的合適載體。方法：將目的基因H4 分別克隆到載體pET20b、pET22b、pET28a 和pET32a 上，分別轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21(DE3)或Origami(DE3)中，比較誘導(dǎo)過程中細(xì)胞的生長狀況和誘導(dǎo)結(jié)束后細(xì)胞破碎液中scFv-H4的生物活性以及細(xì)胞各部分包涵體。結(jié)果：pET20b 和pET22b 能表達(dá)具有生物活性的scFv-H4，這些具有生物活性的蛋白主要存在于周質(zhì)中；pET28a 和pET32a 不能表達(dá)有生物活性的scFv-H4，而pET32a 僅能在細(xì)胞質(zhì)中產(chǎn)生大量的包涵體。結(jié)論：pET22b 可能是表達(dá)AFB1 的單鏈抗體較優(yōu)的表達(dá)載體。
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