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琯溪蜜柚柚皮苷純化鑒定及其對(duì)胰脂肪酶的抑制作用
來(lái)源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 123 發(fā)表時(shí)間: 2022-05-30
作者: 晏幸,肖文熙,歐麗明,上官宇晨,杜希萍,李利君,胡陽(yáng),倪輝
關(guān)鍵詞: 琯溪蜜柚;柚皮苷;分離純化;結(jié)構(gòu)鑒定;胰脂肪酶;非競(jìng)爭(zhēng)性抑制
摘要:

為了探索琯溪蜜柚黃酮作為胰脂肪酶抑制劑的應(yīng)用價(jià)值,本實(shí)驗(yàn)采用Sephadex LH-20葡聚糖柱層析、高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用、傅里葉變換紅外光譜對(duì)琯溪蜜柚柚皮黃酮進(jìn)行分離純化及結(jié)構(gòu)鑒定,并通過(guò)酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)和分子對(duì)接技術(shù)研究其對(duì)胰脂肪酶的抑制類型和分子間相互作用。高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用和傅里葉變換紅外光譜分析結(jié)果表明,純化后的琯溪蜜柚柚皮主要黃酮成分為柚皮苷;純化鑒定的柚皮苷對(duì)胰脂肪酶半抑制濃度(half inhibitory concentration,IC50)為0.99 μg/mL,抑制類型為可逆非競(jìng)爭(zhēng)型,抑制常數(shù)Ki=0.58 μg/mL;該黃酮與胰脂肪酶的結(jié)合自由能為-30.14 kJ/mol,相互間的分子作用力包括范德華力、疏水相互作用、氫鍵、π鍵等,結(jié)合區(qū)域位于酶催化活性中心之外的位點(diǎn)。本研究表明琯溪蜜柚的主要黃酮成分柚皮苷對(duì)胰脂肪酶具有強(qiáng)烈的抑制作用,為利用琯溪蜜柚黃酮開發(fā)高效安全的胰脂肪酶抑制劑提供了理論依據(jù)。

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