領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
目的：通過培養(yǎng)fat-1轉(zhuǎn)基因小鼠下丘腦神經(jīng)干細(xì)胞獲取外泌體并提取總RNA進(jìn)行高通量測(cè)序，研究內(nèi)源性n-3多不飽和脂肪酸（n-3 polyunsaturated fatty acids，n-3 PUFAs）對(duì)丘腦神經(jīng)干細(xì)胞來源外泌體miRNA的調(diào)節(jié)作用，探究n-3 PUFAs抑制下丘腦炎癥及肥胖的作用機(jī)制。方法：分別培養(yǎng)fat-1轉(zhuǎn)基因小鼠與野生型C57BL/6小鼠下丘腦神經(jīng)干細(xì)胞，從細(xì)胞培養(yǎng)上清液中收集外泌體并提取總RNA，經(jīng)高通量測(cè)序后利用生物信息學(xué)技術(shù)對(duì)差異表達(dá)的miRNA進(jìn)行分析及靶基因預(yù)測(cè)，對(duì)靶基因進(jìn)行基因組百科全書（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）富集分析后，利用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（quantitative real-time polymerase chain reaction，qPCR）進(jìn)行相對(duì)表達(dá)量的測(cè)定。結(jié)果：與野生型C57BL/6小鼠相比，fat-1轉(zhuǎn)基因小鼠下丘腦神經(jīng)干細(xì)胞來源的外泌體miRNA具有特異表達(dá)譜，且具有顯著差異表達(dá)的miRNA靶基因處于下丘腦炎癥、脂肪酸代謝等通路中關(guān)鍵位置。經(jīng)qPCR驗(yàn)證，差異表達(dá)的miRNA關(guān)鍵靶基因表達(dá)均受到調(diào)控。結(jié)論：內(nèi)源性n-3 PUFAs水平的增加可以調(diào)節(jié)下丘腦神經(jīng)干細(xì)胞外泌體中miRNA的表達(dá)，進(jìn)而調(diào)控炎癥反應(yīng)與脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的表達(dá)，從而發(fā)揮抑制下丘腦炎癥、抵抗肥胖的作用。
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